uji angka kapang khamir

Uji Angka Kapang Khamir

Ruang Lingkup

Metode ini digunakan untuk menetapkan angka kapang khamir dalam makanan dan minuman, obat tradisional dan sediaan kosmetika.

Prinsip

Pertumbuhan kapang/ khamir setelah cuplikan diinokukalisan pada media yang sesuai dan diinkubasi pada suhu 20 -25 ⁰ C.

Pereaksi khusus

Desinfektan alcohol 70%

Media dan pengencer

Potato Dextrose Agar (PDA) ***catatan : cara pembuatan lihat Farmecofea Indonesia hal 846

Kentang. ¼ kg

Sukrosa ¼ kg

Agar swallow 1 bks

Indikator universal

Asam tatrat / asam citrate 10 % steril

Kertas saring.

Air suling Agar 0,05% (ASA) steril

Pereaksi

Kloramfenicol 100 mg/l media.

Sampel : susu kental manis : AKK : maks 2. 10²koloni / g

Buah kering, ; AKK maks 5. 10¹ koloni/g

Jeli agar ; AKK maks ; 1.10² koloni/ g

Serealia ; AKK Maks ; 1.10⁴ koloni/g

Alat-alat

LAF (laminar air Flow)

Stomaker atau blender

Pipet ukur mulut lebar 10 ml

Pipet ukur 1 ml

Tabung reaksi tinggi 14 cm diameter 1 cm

Cawan petri diameter 10 cm

Lampu spiritus

Cara kerja

1. Pembuatan media PDA **(lihat farmacofe Indonesia IV. Hal 846)

2. Homogenisasi sampel

3. Untuk masing-masing sampel disiapkan 3 buah tabung reaksi yang masing –masing telah diisi 9 ml ASA.

4. Dari hasil homogenisasi pada penyiapan contoh yang merupakan pengenceran 10^-1 dipipet 1 ml kedalam tabung ASA pertama sehingga diperileh pengenceran 10^-2. Dibuat pengenceran berikutnya sehingga diperoleh pengenceran sesui batas maksimum persyaratan masing-masing sampel.

5. Siapkan Cawan petri steril yang telah diisi PDA kurang lebih 12 ml atau secukupnya sampai memenuhi permukaan cawan secara aseptis . Biarkan memadat.

6. Tuangkan 0,5 ml sampel pada permukaan PDA, segera goyangkan dipermukaan meja pola angka 8 sehingga suspensi tersebar merata dan dibuat duplo. Lakukan hal yang sama pada sampel pengenceran berikutnya.

7. Untuk mengetahui sterilitas media dan pengencer dilakukan uji blanko.

- Kedalam satu cawan petri di tuangkan PDA dan dibiarkan memadat

- Kedalam cawan petri yang lain dituangkan PDA dan pengencer 1 ml kemudian dibiarkan memadat.

8. Seluruh cawan petri diinkubasi pada suhu 20 – 25⁰ C dan diamati pada hari ke -3 sampai hari ke -5 . Koloni khamir (ragi) memiliki bentuk bulat kecil, putih, hampir menyerupai bakteri.

9. Jumlah koloni yang tumbuh diamati dan dihitung.